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產品名稱:Cell counting KIT-8 (CCK-8)

產品型號:CK04

產品報價:

產品特點:Cell counting KIT-8 (CCK-8)日本同仁原裝為MTT法的替代方法,是一種基于WST(水溶性四唑鹽,化學名:2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑單鈉鹽)的廣泛應用于細胞增殖和細胞毒性的快速高靈敏度檢測試劑盒??捎糜谒幬锖Y選、細胞增殖測定、細胞毒性測定、腫瘤藥敏等試驗

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CK04Cell counting KIT-8 (CCK-8)的詳細資料:

Cell counting KIT-8 (CCK-8)

產品簡介:
Cell counting KIT-8 (CCK-8)簡稱CCK-8 試劑盒,為MTT 法的替代方法,是一種基于WST(水溶性四唑鹽,化學
名:2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑單鈉鹽)的廣泛應用于細胞增殖和細胞毒性的
快速高靈敏度檢測試劑盒。CCK-8 試劑盒可用于藥物篩選、細胞增殖測定、細胞毒性測定、腫瘤藥敏等試驗

Cell counting KIT-8 (CCK-8)使用說明:
一、制作標準曲線(測定細胞具體數量時)
1、先用細胞計數板計數所制備的細胞懸液中的細胞數量,然后接種細胞。
2、按比例依次用培養基等比稀釋成一個細胞濃度梯度,一般要做3-5 個細胞濃度梯度,每組3-6 個復孔。
3、接種后培養細胞貼壁,然后加CCK-8 試劑培養一定時間后測定OD 值,制作出一條以細胞數量為橫
坐標(X 軸),OD 值為縱坐標(Y 軸)的標準曲線。根據此標準曲線可以測定出未知樣品的細胞數量(試用
此標準曲線的前提是實驗的條件要*,便于確定細胞的接種數量以及加入CCK-8 后的培養時間。)
二、細胞活性檢測
1、在96 孔板中接種細胞懸液(100μL/孔)。將培養板放在培養箱中預培養(在37℃,5% CO2 的條件下)。
2、向每孔加入10μL CCK-8 溶液(注意不要在孔中生成氣泡,它們會影響OD 值的讀數)。
3、將培養板在培養箱內孵育1-4 小時。
4、用酶標儀測定在450nm 處的吸光度。
5、如果暫時不測定OD 值,打算以后測定的話,可以向每孔中加入10μL 0.1M 的HCl 或者1%SDS(W/V)
溶液,并遮蓋培養板避光保存在室溫條件下。在24 小時內吸光度不會發生變化。
三、細胞增值-毒性檢測
1、在96 孔板中配置100 μL 的細胞懸液。將培養板在培養箱預培養24 小時(在37 ℃,5% CO2 的條件下)。
2、向培養板加入10μL 不同濃度的待測物質。在培養箱孵育一段適當的時間(例如:6、12、24 或48 小時)。
3、向每孔加入10 μL CCK-8 溶液(注意不要在孔中生成氣泡,它們會影響OD 值的讀數)。如果待測物質
有氧化性或還原性的話,可在加CCK-8 之前更換新鮮培養基(除去培養基,并用培養基洗滌細胞兩次,然后加
入新的培養基),去掉藥物影響。
4、將培養板在培養箱內孵育1-4 小時。
5、用酶標儀測定在450 nm 處的吸光度。
6、如果暫時不測定OD 值,打算以后測定的話,可以向每孔中加入10μL 0.1M 的HCl 或者1%SDS(W/V)
溶液,并遮蓋培養板避光保存在室溫條件下。在24 小時內吸光度不會發生變化

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