青鏈霉素混合液又稱雙抗,是專門用于細胞培養的,可以直接添加到細胞培養液內。青霉素-鏈霉素溶液(100X)中,青霉素的含量為10000U/ml,鏈霉素的含量為10mg/ml。在細胞培養液中推薦的青霉素的工作濃度為100U/ml,鏈霉素的工作濃度為0.1mg/ml。雙抗起的作用為抗生素、抑制細菌生長、避免細胞污染。
青鏈霉素混合液的制備
用20mL空針抽16毫升三蒸水(或PBS),溶160萬單位/瓶的青霉素G鈉一支,過濾除菌;用10mL空針抽10毫升三蒸水(或PBS),溶一支100萬單位/瓶的硫酸鏈霉素一支,過濾除菌。分裝EP管中,-20度保存。使用前每100m培養液加雙抗各100ul-150u即可。細胞培養液雙抗濃度:青霉素G鈉,100-1000U/ml;硫酸鏈霉素,100-1000μg/ml(100萬單位=1g)。
試驗中常見問題
1、細胞培養中加的雙抗的濃度是多少?
一般細胞培養都是買的雙抗儲存液吧,上面會寫著X100 就是稀釋100倍加入培養液唄,比如500ml培養液,加50mlFBS,5ml雙抗
.2、細胞培養中加的雙抗有什么作用?
抗生素:常用的是青鏈霉素,俗稱“雙抗溶液”。青霉素主要是對革蘭陽性菌有效,鏈霉素主要對格蘭陰性菌有效。加入這兩種抗生素可預防絕大多數細菌污染。雙抗對細菌有用,加入培養基一周有效,之后失活,起到一點預防細菌污染的作用,如果培養條件好,可以不加。建議藥物實驗不加雙抗,因為它對細胞形態、代謝還是有一點影響。
青鏈霉素混合液為索萊寶常備貨產品,貨號為P1400。索萊寶所售青鏈霉素混合液(100X) (Penicillin-Streptomycin Solution, 100X)用于預防細胞培養的細菌污染,特別是革蘭氏陽性和陰性細菌的污染。產品經過濾除菌處理,可以直接添加到細胞培養液內。